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登革熱檢測試劑（elisa）Panbio Dengue IgM Capture ELISA 用于定性檢測血清中登革熱病原的 IgM 抗體，輔助臨床實驗室診斷出現登革熱病毒臨床癥狀的患者。Panbio Dengue IgM Capture ELISA 應該與其它登革熱血清測試聯用。
更新時間：2025-01-03
登革熱檢測試劑（elisa)
Panbio Dengue IgM Capture ELISA
產品目錄號 01PE20
預期用途
Panbio Dengue IgM Capture ELISA 用于定性檢測血清中登革熱病原的 IgM 抗體，輔助臨床實驗室診斷出現登革熱病毒臨床癥狀的患者。Panbio Dengue IgM Capture ELISA 應該與其它登革熱血清測試聯用。
登革熱病毒是黃病毒屬，主要分布于熱帶和亞熱帶地區。通過蚊子傳播，主要是埃及伊蚊和白紋伊蚊。登革熱病毒感染可導致一系列的臨床癥狀，從不明顯的癥狀到致死性的出血性疾病。典型登革熱或斷骨熱的特征是突然發熱、劇烈頭痛、肌痛、關節痛和皮疹。雙相發熱病程常見失眠和厭食，失去味覺或口苦。登革出血熱和登革休克綜合征都是嚴重的并發癥，通常與感染第二種血清型有關。利用 ELISA 方法檢測登革熱病毒的 IgM 抗體是非常重要的程序，尤其是對于繼發性登革熱病毒感染，繼發性感染患者并發癥的發生幾率較高。盡管檢測水平在感染后八個月仍存在，登革熱出現三至五天后便可檢測到血清 IgM 抗體且通常可持續 30-90 天。
血清中存在的登革熱病毒 IgM 抗體，與微孔測試條上聚苯乙烯表面附著的抗人 IgM 抗體結合。用抗原稀釋劑將濃縮的登革熱 1-4 型抗原溶液稀釋到正確的工作容積。用昆蟲細胞表達系統產生抗原，用特異性單克隆抗體純化抗原。在稀釋后的抗原中添加等體積的辣根過氧化物酶（HRP）標記單克隆抗體（MAb），形成抗原 MAb 復合物。清洗測定板上的剩余血清，將抗原 MAb 復合物添加到測定板中。在培養完成后清洗微孔，再添加無色的底物系統- 四甲基聯苯胺/過氧化氫（TMB 顯色液）。底物被酶水解后，顯色液變藍。用酸終止反應后，TMB 變黃。顯色表示測試樣本中存在抗登革熱 IgM 抗體。
4. 樣本稀釋劑– 2 瓶， 50 mL（粉色）。即用型。Tris 緩沖生理鹽水（pH 7.2 – 7.6），含防腐劑（0.1% Proclin™）和添加劑。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
5. 抗原稀釋劑 – 1 瓶，50mL（無色）。即用型。磷酸鹽緩沖液，含防腐劑（0.1% Proclin™和 0.005%
慶大霉素）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
6. HRP 標記單克隆抗體示蹤劑 – 1 瓶，7mL（黃色）。即用型。辣根過氧化物酶（HRP）標記單克隆抗體示蹤劑，含防腐劑（0.1% Proclin™）和蛋白穩定劑。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
7. TMB 顯色液（TMB） - 1 瓶，15mL。即用型。3,3’,5,5'-四甲基聯苯胺和過氧化氫的混合物，存放于枸櫞酸鹽緩沖液中（pH 3.5 – 3.8）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
8. 陽性質控品– 1 瓶，黑色瓶蓋，200μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
9. 校準品– 1 瓶，橙色瓶蓋，400μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
10. 陰性質控品– 1 瓶，白色瓶蓋，200μL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩定。
11. 終止液 – 1 瓶，紅色瓶蓋，15mL。即用型。1M 磷酸。有效期內儲存于 2-25℃可保持穩定。
需要但未提供的材料
1. 精確、可調節的微量移液器，含一次性吸液頭（5-1000 μL 容積）
2. 去離子水
3. 標板清洗系統
4. 酶標儀，含 450nm 濾波器
5. 計時器
6. 刻度量筒
7. 燒瓶
8. 試管或微滴定板，用于稀釋血清
9. 稀釋抗原的玻璃管或塑料管
用于體外診斷
1. 在制備質控品的過程中使用的所有人源性材料已經過人類免疫缺陷病毒 1/2（HIV 1/2）抗體、丙肝
（HCV）和乙肝表面抗原的檢測，結果為陰性。但是，任何測試方法都不能*確信，且所有人源性質控品和抗原都應按照潛在傳染性材料處理。疾病控制和預防中心以及美國國立衛生研究院建議將潛在傳染原按照生物安全二級 1 處理。
2. 該測試只能使用血清執行。尚未建立使用全血、血漿或其它標本基質的方法。
3. 不可使用黃疸或脂血癥血清，以及出現溶血或微生物生長的血清。
4. 不可加熱，否則血清將失去活性。
5. 在開始檢測前所有試劑必須平衡至室溫（20-25℃）。檢測受溫度變化的影響。微孔板在達到室溫
（20-25℃）之前不可從密封袋中取出。
6. 直接用干凈的吸液頭從試劑瓶中吸出試劑。轉移試劑可能導致污染。
7. 未使用的微孔應該立即重新密封并儲存于干燥環境中。 否則將產生錯誤結果。
8. 底物系統：
(a) 由于 TMB 易受金屬離子的污染，所以底物系統不能與金屬表面接觸。
(b) 避免長時間陽光直射。
(c) 有些清潔劑可干擾 TMB 的性能。
(d) TMB 可能呈現淡藍色，這不影響底物的活性或測定結果。
9. 某些試劑盒組成包含疊氮話鈉，疊氮話鈉可能與鉛或銅管反應形成極易爆炸的金屬疊氮化合物。通過管道裝置處理這些試劑時，請用大量清水沖洗以避免疊氮化物在排水管內累積。
疊氮話鈉還抑制酶標物的活性。在添加酶標物時必須使用干凈的吸液頭，避免攜帶其它試劑的疊氮話鈉。
登革熱檢測試劑（elisa)
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