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登革熱抗原NS1早期檢測試劑登革熱病毒是黃病毒屬，主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)。世界上一半以上的人口居住于具有登革熱潛在傳播風險的地區(qū)，登革熱是導致人類發(fā)病和死亡嚴峻的蟲媒病毒疾病 1。登革熱病毒有 4 種不同但抗原相關的血清型，通過蚊（主要是埃及伊蚊、白紋伊蚊傳播和波利尼西亞斑蚊）傳播。
更新時間：2025-01-03
登革熱抗原NS1早期檢測試劑
Panbio Dengue Early ELISA
產品目錄號 01PE40
Panbio Dengue EARLY ELISA 是一種登革熱NS1 抗原捕獲 ELISA。 用于定性檢測血清中的 NS1 抗原， 輔助臨床實驗室診斷出現(xiàn)登革熱臨床癥狀的患者。 Panbio Dengue EARLY ELISA 應該與其它登革熱血清診斷法聯(lián)用。
登革熱病毒是黃病毒屬，主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)。世界上一半以上的人口居住于具有登革熱潛在傳播風險的地區(qū)，登革熱是導致人類發(fā)病和死亡嚴峻的蟲媒病毒疾病 1。登革熱病毒有 4 種不同但抗原相關的血清型，通過蚊（主要是埃及伊蚊、白紋伊蚊傳播和波利尼西亞斑蚊）傳播。
登革熱病毒感染的臨床表現(xiàn)各不相同，從亞臨床表現(xiàn)到致命。依據(jù)嚴重程度，該疾病被分為以下等級：非特異性發(fā)熱疾病，典型登革熱，登革出血熱（DHF）（1 級和 2 級），和登革休克綜合征（DSS）（3 級和 4 級）1。典型登革熱的特征是突然發(fā)熱并至少伴隨以下 2 種癥狀：頭痛、眼眶后疼痛、肌痛、關節(jié)痛、皮疹、出血表現(xiàn)或白血球減少癥 2。雙相發(fā)熱病程常見失眠和厭食，失去味覺或口苦。DHF 和 DSS 是嚴重的潛在致命性并發(fā)癥，通常與感染第二種血清型有關 3。
登革熱的早期診斷允許進行早期的支持療法和監(jiān)控。這降低了 DHF 或DDS 等并發(fā)癥發(fā)生的風險，尤其是在登革熱流行的國家 4。
通過ELISA 檢測登革熱NS1 抗原是一種非常重要的方法，因為它能夠在血清轉化之前進行感染檢測。 從發(fā)病后的第 1 天直到第 9 天都能在血清中檢測到NS1 抗原 5,6,7（見圖示）。這區(qū)別于 IgM 抗體，因為 IgM 抗體直到發(fā)病后 3-5 天后才檢測得到。繼發(fā)性登革熱病毒感染的特征是高 IgG ， 水平且其峰值檢測窗口是在發(fā)病后的 6-15 天。這可能伴隨著 IgM 水平升高 10,11。Panbio Dengue IgG Capture ELISA 用于檢測登革熱感染的 IgG 抗體水平相對于閾值特異性升高。該試驗不用于檢測既往感染引起的低水平 IgG 抗體，這種情況通常見于地方性流行區(qū)的較多人群。為了為準確地從發(fā)病后的不同階段診斷登革熱患者，應該使用Panbio Dengue EARLY ELISA (01PE40)，Panbio Dengue lgM Capture ELISA (01PE20) 和 Panbio Dengue lgG Capture ELISA (01PE10)三者相結合的方法。
血清中存在的登革熱 NS1 抗原，與微孔板上聚苯乙烯表面附著的抗 NS1 抗體相結合。洗去剩余的血清并添加 HRP 標記的抗 NS1 單克隆抗體。在培養(yǎng)完成后清洗微孔，再添加無色的底物系統(tǒng) - 四甲基聯(lián)苯胺/ 過氧化氫（TMB 顯色液）。底物被酶水解后，TMB 顯色液變藍。用酸終止反應后，TMB 變黃。顯色表示測試樣本中存在登革熱NS1 抗原。
8. 陰性質控品– 1 瓶，白色瓶蓋，1.2mL 人血清（含 0.1%疊氮話鈉和 0.005%硫酸慶大霉素）。有效期內儲存于 2-8℃可保持穩(wěn)定。
Proclin™ 300 是 Rohm 和 Haas 公司的注冊商標。
需要但未提供的材料
1. 精確、可調節(jié)的微量移液器，含一次性吸液頭（5-1000μL 容積）
2. 去離子水
3. 標板清洗系統(tǒng)
4. 酶標儀，含 450nm 濾波器
5. 計時器
6. 刻度量筒
7. 燒瓶
8. 用于稀釋的試管或微滴定板
用于體外診斷
3. 不可使用黃疸或脂血癥血清，以及出現(xiàn)溶血或微生物生長的血清。
4. 不可加熱，否則血清將失去活性。
5. 在開始檢測前所有試劑必須平衡至室溫（20-25℃）。檢測受溫度變化的影響。微孔板在達到室溫
（20-25℃）之前不可從密封袋中取出。
6. 直接用干凈的吸液頭從試劑瓶中吸出試劑。轉移試劑可能導致污染。
7. 未使用的微孔應該立即重新密封并儲存于干燥環(huán)境中。否則將產生錯誤結果。
8. 底物系統(tǒng)：
(a) 由于 TMB 易受金屬離子的污染，所以底物系統(tǒng)不能與金屬表面接觸。
(b) 避免長時間陽光直射。
(c) 有些清潔劑可干擾 TMB 的性能。
TMB 可能呈現(xiàn)淡藍色，這不影響底物的活性或測定結果。
9. 某些試劑盒組成包含疊氮話鈉，疊氮話鈉可能與鉛或銅管反應形成極易爆炸的金屬疊氮話合物。通過管道裝置處理這些試劑時，請用大量清水沖洗以避免疊氮化物在排水管內累積。
10. 疊氮話鈉還抑制酶標物的活性。在添加酶標物時必須使用干凈的吸液頭，避免攜帶其它試劑的疊氮話鈉。
登革熱抗原NS1早期檢測試劑
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